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目的:本研究拟以高表达Her-2/neu癌基因蛋白乳腺癌细胞株制备HSP70-Her-2/neu癌基因蛋白复合物,并用其负载树突状细胞(dendritic cells,DCs)体外制备Her-2/neu特异性DCs肿瘤疫苗。以期实现针对Her-2/neu高表达乳腺癌患者的个体化Her-2/neu特异性DCs肿瘤疫苗主动免疫治疗。方法:采用裂解液裂解(含去垢剂)、超声破碎、高速离心、ConA Sepharose亲和层析结合ADP agarose亲和层析方法,从热休克处理后的乳腺癌细胞株SKBR-3中分离纯化出HSP70-Her-2/neu癌基因蛋白复合物。体外将HSP70-Her-2/neu癌基因蛋白复合物负载DCs,制备DCs肿瘤疫苗。进行以下研究:①应用激光免疫共聚焦技术观察DCs摄取肿瘤抗原情况;②以未加肿瘤抗原的DCs、体外构建的重组人HSP70-Her-2/neu癌基因蛋白复合物制备的DCs肿瘤疫苗及重组人Her-2/neu癌基因蛋白负载DCs制备的DCs肿瘤疫苗作为对照组,分别检测各组DCs的表型、及其对自体CTL细胞分泌IFN-γ的刺激作用。