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目的 甲型流感在动物与人群中普遍存在，对两者的健康都会造成巨大的危害，历史上的数次流感大流行严重威胁了物种的生存。为快速诊断常见人兽共患流感亚型，本研究构建了一种可同时检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2亚型流感病毒的多重荧光RT-PCR方法。方法 根据不同亚型流感HA与NA的差异，针对保守片段，使用软件设计相对的特异性引物及探针，构建合适的检测体系并分析其特异性、灵敏度、可重复性、在不同仪器上的适用性，并在同等条件下与常用检测试剂盒进行荧光值水平进行比对。