论文部分内容阅读
目的:探讨猫爪草醇类提取物对小鼠骨髓来源巨噬细胞极化的影响。方法:取BALB/c小鼠的胫股骨骨髓细胞,经GM-CSF诱导获取M0型巨噬细胞,流式检测F4/80和CD11b的表达;分别用IFN-γ、IL-4诱导M0型巨噬细胞,荧光定量PCR、ELISA检测各组细胞IL-6、TNF-α、i NOS、TGF-β、IL-10、Arg-1的表达情况,构建小鼠骨髓来源M1/M2型巨噬细胞的技术平台;用0.01μg/ml猫爪草醇类提取物刺激M0型巨噬细胞,分别孵育0、12、24、36、48、72h,采用ELISA检测不同时间点细胞培养液上清的IL-10、TGF-β、TNF-α的表达情况;qRT-PCR检测细胞内的IL-6、TNF-α、i NOS、TGF-β、IL-10、Arg-1的表达情况;流式检测巨噬细胞表明膜分子CD206和CD86的表达情况。结果:流式检测发现共培养后的骨髓细胞F4/80和CD11b双阳比例达90%以上;qRT-PCR、ELISA检测发现,M1型巨噬细胞高表达IL-6、TNF-α、i NOS;M2型巨噬细胞高表达TGF-β、IL-10、Arg-1。猫爪草醇类提取物刺激巨噬细胞后,ELISA检测发现TNF-α高表达,而TGF-β和IL-10低表达;qRT-PCR检测显示M1型相关细胞因子IL-12、TNF-α、i NOS高表达,M2型相关细胞因子IL-4、TGF-β、IL-10、Arg-1低表达;流式检测显示猫爪草作用后巨噬细胞表面膜分子CD86高表达,CD206低表达。结论:成功诱导了小鼠骨髓来源的M1/M2型巨噬细胞;猫爪草醇类提取物促进M0型巨噬细胞高表达M1型相关的细胞因子及巨噬细胞表面膜分子CD86,可促进M0型巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化。