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目的:探讨树突状细胞(DC)固有胆碱能系统与幼年特发性关节炎(JIA)炎症反应的关系。
方法:分离正常小鼠骨髓细胞,体外用细胞因子(rmIL-4,rmGM-CSF)诱导、分化培养成幼稚DCs,细菌脂多糖(LPS)刺激其成熟。光学显微镜观察其形态,流式细胞术对其进行鉴定;流式细胞术检测正常血清组、JIA活动期血清组和JIA活动期血清+美加明(MEC)组对DC nAChRα7 表达的影响;ELISA方法检测三组作用DC 18h前后,培养上清中IL-12含量;MTT法检测正常血清刺激的DC条件培养液组、JIA活动期血清刺激的DC条件培养液组、MEC 干预的JIA活动期血清刺激的DC条件培养液组对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。
结果:三组作用于成熟DC 18h后DC nAChRα7表达率(%)分别为:39.80±4.12、52.66±7.99和45.49±7.73,JIA活动期血清组与正常血清组比较,nAChRα7表达明显增强(p<0.05),而美加明(MEC)作用后,nAChRα7表达有下调趋势;三组作用于成熟DC 18h前后,培养上清中IL-12含量分别为23.823±3.555pg/ml,975.525±206.638pg/ml,975.525±206.638pg/ml和48.893±9.562pg/ml 、1281.175±228.586pg/ml、1618.075±292.81pg/ml,培养前后JIA 活动期血清组比正常血清组IL-12 含量均明显增高(p<0.01),而培养后,MEC 干预组IL-12 含量较JIA活动期血清组更高(p<0.05);三组血清刺激的DC条件培养液联合小剂量ConA对小鼠脾淋巴细胞增殖结果(SI值)分别是:1.979±0.307、3.053±0.432、3.672±0.817。MEC 干预组增殖作用最强,JIA活动期血清刺激的DC 条件培养液组次之。与正常血清刺激的DC条件培养液组比较增殖作用显著(p<0.01)。
结论:JIA活动期血清能刺激DC,使nAChRα7 表达上调,MEC则下调nAChRα7 表达,同时,伴有IL-12等炎性因子分泌及淋巴细胞增殖增强,可能与DC抑制胆碱能系统的抗炎作用有关。