香菇高温胁迫下热激蛋白DnaJ、色氨酸及生长素IAA代谢的表达调控研究

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高温胁迫显著影响香菇(Lentinula edodes)菌丝生长和子实体生长发育,降低香菇对其他生物胁迫和非生物胁迫的抗性,常造成巨大的经济损失。研究发现,在受到40℃高温胁迫后,耐热菌株(S606)与色氨酸和生长素代谢相关的蛋白Trp E、TrpD、Tam-1和YUCCA的含量显著升高,热激蛋白HSP40 LEDnaJ(LE01Gene01273)显著被诱导产生,但在热敏感菌株(Y3357)中这些蛋白含量显著减少。在耐热菌株S606和热敏感菌株Y3357中,LEDnaJ转录水平显著上调,LEtrpE转录水平显著下调,LEYUCCA转录水平上调,其它色氨酸及IAA合成相关的酶基因变化不显著。将LEDnaJ基因在耐热菌株S606进行超量表达,筛选出两个LEDnaJ表达量分别上调7倍和13.9倍的两个转化子,并进行功能验证。热胁迫温度提高到41℃处理24h后,S606菌株LEDnaJ过表达转化子菌丝在回复培养第11d开始萌发,但S606野生菌株不能恢复生长,说明LEDnaJ的过表达提高了S606菌株的耐热性。外源添加色氨酸和邻氨基苯甲酸能够促进高温胁迫后的耐热菌株S606菌丝生长,但不能恢复热敏感菌株Y3357高温胁迫后菌丝的生长;合适浓度的IAA能够恢复热敏感菌株Y3357高温胁迫后菌丝的生长,且高温胁迫后耐热菌株S606和热敏感菌株Y3357中胞内IAA含量分别升高了约8倍和2倍,过高浓度IAA则抑制S606和Y3357菌丝的高温胁迫后恢复能力。酵母双杂试验表明,LEDnaJ和Trp E之间存在相互作用,且高温处理后这种相互作用更为明显。研究结果表明,在香菇耐热反应过程中,色氨酸和IAA代谢途径通过热激蛋白LEDnaJ和TrpE等相关蛋白相互作用,调控香菇菌丝对热胁迫的响应及抵御反应。
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