目的:通过五肽的连接肽构建含变形链球菌表面蛋白A区(PAc-A)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的嵌合表达质粒,并表达融合蛋白质,为下一步利用转基因植物技术生产可食嵌合体防龋疫苗的研究打下基础。方法:用PCR方法扩增pacA、ctxB1 片段,将它们克隆到含T7启动子的pET32a(+)中,构建含双基因的原核表达质粒pEAC5,转化E．coli BL-21(DE3)经IPTG诱导后表达融合蛋白。嵌合表达质粒经酶切、PCR、洲序鉴定,SDS-PAGE分析融合蛋白。结果:目的基因pacA、ctxB1定向插入至原核表达载体pET32a(+)中,中间连接肽编码序列与设计一致,未改变目的基因的阅读框架,插入的相位正确;表达的融合蛋白分子量与预期的分子量一致。结论:成功的构建了原核嵌合表达质粒pEAC5,并获得正确表达的融合蛋白。