微孔板法用于蛋白高通量快速测定的研究

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蛋白质是水产品的主要组分,其含量测定在水产品加工及研究等方面应用极为广泛。目前,各蛋白含量快速测定方法通常是在试管中进行反应并应用分光光度计测定,其操作过程较繁琐,分析大批量样品时效率低,上述缺点在高通量筛选、检测等场合尤为突出。为了克服该不足,实现蛋白含量的快速高通量测定,本研究基于Folin-酚法,利用96孔板作为反应器并配合酶标仪比色,建立了一种蛋白含量测定的微孔板方法并评价其合理性。该法测得样品的蛋白含量与常规法结果无显著性差异,反应在30-90min显色稳定,标准曲线的线性相关系数R~2=0.9922,标准偏差范围为0.07%-0.78%,检测限为10μg。与常规法相比,微孔板法保持了Folin-酚法的准确性及稳定性,同时具有通量高、节省样品、试剂及测定时间等优点,在蛋白高通量快速测定方面更具优势。
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