【摘 要】
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为缩短组织工程皮肤体外构建时间,适应临床皮肤移植的实际需要,我们建立了以胶原凝胶法体外同步构建具有表皮和真皮结构组织工程皮肤的新方法.手术获取成年兔自体皮肤组织块,分离角质形成细胞(K)和成纤维细胞(Fb),并分别以K-SFM无血清培养液和含血清的DMEM进行体外培养扩增,将培养的Fb混入胶原凝胶形成真皮层,同时接种Kc,在双倍Ca的无血清培养液中培养3d,升至气液界面培养1周.结果表明,该人工皮
【机 构】
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中科院长春应化所(长春) 吉林大学(长春)
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为缩短组织工程皮肤体外构建时间,适应临床皮肤移植的实际需要,我们建立了以胶原凝胶法体外同步构建具有表皮和真皮结构组织工程皮肤的新方法.手术获取成年兔自体皮肤组织块,分离角质形成细胞(K<,c>)和成纤维细胞(Fb),并分别以K-SFM无血清培养液和含血清的DMEM进行体外培养扩增,将培养的Fb混入胶原凝胶形成真皮层,同时接种Kc,在双倍Ca<2+>的无血清培养液中培养3d,升至气液界面培养1周.结果表明,该人工皮肤有一定的弹性和韧性;组织学观察,可见表皮和真皮双层结构,表皮层连续,由2~3层Kc组成,可见规则排列的基底细胞和少量角化物形成,真皮层内可见散在或聚集分布的Pb,与胶原纤维互相连结成网状,生长状态良好.提示,凝胶法同步构建组织工程皮肤可大大缩短体外过程,在新型敷料的支持下,甚至可直接应用于自体移植修复.
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