龈沟线状杆菌感染人牙龈上皮细胞的宿主应答反应

来源 :2013年全国第四次牙体牙髓病学临床研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luzhenning
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  目的:探讨龈沟线状杆菌与牙龈上皮细胞株TIGKs细胞间的宿主应答反应,分析龈沟线状杆菌单独感染以及联合牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌共同感染下TIGKs炎症细胞因子的表达,探索引起宿主细胞凋亡的信号转导通路.方法:1.龈沟线状杆菌单独感染以及联合牙龈卟啉单胞菌或具核梭杆菌共同感染TIGKs,MOI50,感染时间6小时,24小时,48小时.收集培养上清,使用ELISA检测促炎症细胞因子IL-1β,IL-6,IL-8和TNF-a,凋亡启动蛋白Caspase-8,凋亡效应蛋白Caspase-9;提取蛋白,使用Western blot检测抗凋亡蛋白Bc1-2,促凋亡蛋白Bax,信号转导蛋白Fox01及其磷酸化水平.2.GFP-NF-κ B-P105,GFP-NF-κ B-P65质粒转染进入TIGKs,MOI50龈沟线状杆菌细菌感染6小时,4% PFA固定,使用含有DAIP染料的VECTASHIELD封固.Olympus激光共聚焦扫描显微镜观察分析NFκ B-P105,P65核移位.
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