【摘 要】
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为寻找有效的家畜日本血吸虫病诊断抗原,我们用从感染日本血吸虫的绵羊、黄牛、水牛血清中纯化的IgG,以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫(44 d)噬菌体展示cDNA文库。每种
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
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为寻找有效的家畜日本血吸虫病诊断抗原,我们用从感染日本血吸虫的绵羊、黄牛、水牛血清中纯化的IgG,以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫(44 d)噬菌体展示cDNA文库。每种动物IgG进行二轮筛选,经六轮筛选后,随机挑取110个阳性噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析,获得了54个有效EST序列,其中42条EST序列与已知基因或表达序列标签同源,12个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,以噬菌体展示载体的10B衣壳蛋白开放阅读框(ORF)为依据,对上述42个与GenBank数据库资料同源的EST进行对码分析,结果21个EST序列能和噬菌体展示载体阅读框对码,为有效展示序列。其中血吸虫MRP1(Multidrug Resistance Protein 1)序列在所有测序结果中有20个重复。本文筛选结果为今后开展诊断抗原基因的克隆、表达和诊断效果评估创造了条件。
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