鲨鱼皮蛋白肽的制备、分离纯化及抗氧化活性研究

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鱼皮富含蛋白质,其中胶原蛋白最为丰富,具有较高的营养价值和功效。本研究以鲨鱼皮为原料,以DPPH自由基清除能力为主要评价指标,对鲨鱼皮进行酶解,并优化水解条件(pH、时间、酶底比、底物浓度和温度),得到具有抗氧化活性的小分子多肽,并探究其分子量分布以及抗氧化活性。采用反向高效液相色谱(RL-HPLC)和LC-ESI/MS/MS对所制备的鲨鱼皮蛋白肽分离纯化及鉴定,分析其主要活性成分。结果表明,最佳酶解工艺为:pH 8.0,反应时间5h,酶底比9%,底物浓度为3%,温度为45℃;在此工艺条件制备的蛋白肽分子质量主要分布在180-500 u,其ABTS自由基清除活力IC50=3.19 mg/mL,DPPH自由基清除活力IC50=0.08 mg/mL,羟基自由基清除活力IC50=4.48 mg/mL,此外鲨鱼皮蛋白肽能够减缓亚油酸的氧化速度。从制备的鲨鱼皮蛋白肽分离并鉴定了4种多肽,分别为Ala-Ala-Gly-Pro-Ala(385.17 u),Gly-Ala-Ala-Val-Ala-Leu(500.30 u),Pro-Ser-Pro-Gly-Ala-Val(526.28 u)和Pro-Pro-Asn(326.25 u)。本研究为鲨鱼皮抗氧化活性肽分离纯化提供了科学依据,以及在食品中的应用提供了基础数据。
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