金钱鱼Na+、K+-ATP酶α1及β1基因的克隆及表达研究

来源 :2012年全国博生研究生学术论坛——可持续的水产养殖:理论与实践 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lixuhai88888
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  盐度是影响水生动物生长的重要生态因子之一,进行有效的渗透压调节进而维持鱼体内外的渗透平衡,对于鱼类的存活、生长和繁殖具有重要意义。鱼类盐度适应过程极其复杂,近年来,对于硬骨鱼类的渗透压调节机制的研究越来越多。已有研究表明,Na+、K+-ATP酶不仅可以泵出Na+吸收K+,调整体内Na+、K+离子浓度,同时可为氯细胞内其它离子的跨膜主动转运供能,在硬骨鱼类渗透压调节行使重要作用,成为近年来鱼类生理学的重要研究内容。金钱鱼(Scatophagus argus Linnaeus),又名金鼓鱼,隶属鲈形目(Perciformes),对盐度超强的适应性使其非常适合作为研究硬骨鱼渗透压调节的材料。论文采用RT-PCR和RACE技术首先克隆了金钱鱼Na+、K+-ATP酶α1及β1基因的cDNA全长序列并利用软件进行序列分析,同时利用实时荧光定量RT-PCR技术对Na+、K+-ATP酶α1及β1基因在金钱鱼成体时空表达情况进行研究。另外通过Western Blot结合免疫荧光技术对Na+、K+-ATP酶α1的表达进行定量和定位研究,采用co-IP技术初步得到与Na+、K+-ATP酶共同在渗透压调节过程中作用的蛋白。通过这些结果初步推断Na+、K+-ATP酶在金钱鱼渗透压调节过程中的功能,为进一步深入研究Na+、K+-ATP酶基因的功能及调控机理奠定基础,这为鱼类盐度驯养提供理论依据,对海水经济鱼类的淡化养殖具有重要的参考价值。
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