橡胶树白粉菌对橡胶树叶片的早期侵染的细胞学形态观察及通过微量孢子PCR基因表达的直接检测

来源 :中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guhong_2
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  本实验中,将24时龄的橡胶树白粉菌孢子配制成1×105个/ml的孢子悬浮液,接种于活体橡胶树叶片上,并在接种后的不同时段采取叶片,用考马斯亮蓝染色配合以荧光素钠染色的方法观察,可清楚的观察到橡胶树白粉菌在橡胶树叶片上的侵染过程,即孢子萌发,附着胞芽管产生(侵染前接触阶段);形成指状或掌状吸器,产生入侵栓(侵染叶片细胞及扩展阶段);到形成初生菌丝及次生菌丝等(叶表的扩展阶段)。橡胶白粉菌的成功侵染会造成寄主细胞的死亡,引起其过敏性反应。侵染期的橡胶白粉菌的叉状附着胞芽管的产生是沿着橡胶树叶片表皮细胞之间的间隙生成,并在细胞间隙上方膨大而形成附着胞,附着胞下端产生入侵栓,最终使得橡胶树白粉菌的侵染成功。而从感病叶片上搜集的少量孢子上通过RT-PCR/nested PCR以及multiplex PCR/nested PCR似乎可以扩增转录表达。因此,将两步法PCR与以不同时段的染色观察相互结合可以有效的观察到孢子在橡胶树叶片表面上的生长发育情况以及相关基因(TUB2-ol (AB204904》)和(CUT1-ol(AB204905))在孢子萌发产生芽管前后的表达情况。
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