【摘 要】
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小肠上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IEC)是肠道主要的功能细胞,参与肠道食糜的消化、吸收、免疫屏障和应激反应,并与肠道的内、外分泌功能密切相关.本试验旨在获
【机 构】
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湖南农业大学动物科技学院,长沙410128
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会
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小肠上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IEC)是肠道主要的功能细胞,参与肠道食糜的消化、吸收、免疫屏障和应激反应,并与肠道的内、外分泌功能密切相关.本试验旨在获取具有特定性状和存活率高的猪小肠上皮细胞,探讨猪小肠上皮细胞体外培养的最适条件,为进一步研究小肠细胞对营养物质的吸收转运机理提供理想的体外模型.本研究以新生仔猪小肠为材料,采用组织块培养法与胰酶消化法分别对原代小肠上皮细胞进行体外培养,用刮除法对小肠上皮细胞进行纯化,用0.05％Trypsin-EDTA进行消化传代,通过形态学观察及免疫荧光检测进行鉴定.结果表明：原代培养的小肠上皮细胞,单个细胞贴壁快,大多数在24h内即完成贴壁,而细胞团和组织块贴壁慢,大概需要24 ～48h；采用组织块培养法,可以分离纯化出增殖能力较强的上皮细胞,并可进行传代培养；采用已灭菌200μl枪头进行刮除,不会对细胞瓶产生划痕,且刮除效果较好；通过形态学观察及免疫荧光检测试验表明猪IEC呈现多角形或卵圆形,单层贴壁生长,呈现典型的"铺路石"状排列.结果提示,组织块培养法获取的肠上皮细胞活性较强.
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