电光叶蝉鸟氨酸脱羧酶抗酶参与水稻条纹花叶病毒侵染的机制

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水稻条纹花叶病毒(Rice stripe mosaic virus,RSMV)属于弹状病毒科胞质型弹状病毒属的一个新种,由电光叶蝉以持久增殖型方式传播。目前已明确其在介体内的侵染途径,但其增殖机制尚不清楚。本研究通过酵母双杂交技术筛选到电光叶蝉中与RSMV-M互作的候选互作蛋白鸟氨酸脱羧酶抗酶Ⅰ(Ornithine decarboxylase antizyme 1,OAZ1),并利用GST-pull down证实了OAZ1与RSMV-M之间存在特异性互作。OAZ1是细胞内多胺代谢通路中鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)的抑制酶,主要通过反馈性负调控多胺的合成。本研究发现RSMV侵染可诱导电光叶蝉OAZ1蛋白上调表达,同时ODC的表达也上调。在叶蝉体内利用dsRNA诱导的RNA干扰技术抑制OAZ1的表达,可以显著降低RSMV的增殖,而抑制ODC的表达,对病毒的增殖无显著影响。进一步通过免疫荧光标记和免疫电镜发现OAZ1和RSMV-M在RSMV侵染的昆虫体内共定位,两者均标记在病毒原质周围的病毒粒体上,推测OAZ1与RSMV的侵染有关。利用杆状病毒表达系统发现M蛋白单独表达形成小管结构,OAZ1单独表达形成颗粒状结构,当两者共表达时OAZ1与M共定位形成小管结构。基于M是病毒粒体的基质蛋白并参与粒体的装配,推测OAZ1蛋白也参与了RSMV粒体的装配。在叶蝉细胞内抑制OAZ1的表达,阻碍RSMV向邻近细胞的再侵染,进一步表明抑制OAZ1阻碍了病毒粒体的装配而无法再侵染邻近细胞。综合以上结果,本研究解析了OAZ1在RSMV侵染过程中的重要功能,揭示了RSMV与介体叶蝉互作的新机制。
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