转基因动物简便、快速、可视化核酸检测方法的建立

来源 :第十六次全国动物遗传育种学术讨论会暨纪念吴仲贤先生诞辰100周年大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yidingtongguo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
转基因生物的安全评价是转基因生物及其产品市场化和商品化的前提,在安全评价中转基因成分的检测是一项重要内容,建立转基因生物快速、简便、准确的检测方法为安全评价和管理奠定基础。转基因生物的核酸检测方法包括PCR、Southern杂交、生物芯片等。环介导等温扩增技术(LAMP)是一种新型的核酸扩增方法,针对靶序列的6个区域设计4条特异性引物,利用一种链置换DNA聚合酶在恒温条件下扩增,多用于快速简便的检测目的基因的有无。本研究的目旨在通过LAMP方法建立针对转基因动物的简便、快速、可视化核酸检测方法,为转基因动物的安全评价提供技术支撑。
其他文献
腺瘤样结肠息肉易感基因(APC)基因是家族性结肠息肉瘤(FAP)以及散发性结肠癌的抑癌基因,该基因的突变与癌症的发生有密切关系。APC基因家族包括APC1,和APC2两个基因,APC基因编码的APC蛋白是一个多功能抑制肿瘤的蛋白家族,通过负性调节β-catenin直接参与Wnt信号传导途径,APC可能通过调节β-catenin来调节细胞内功能,包括细胞间粘连、细胞骨架结构、调节斑珠蛋白水平、调节细
口蹄疫病毒(FMDV)属小RNA病毒科口蹄疫病毒属。FMD病毒粒子外壳由结构蛋白VP1、VP2、VP3和VP4各60个分子构成。其中,VP1和VP3是主要免疫性抗原。VP1基因中关键氨基酸的点突变可以改变病毒的抗原性,分析该高变区不仅对FMDV遗传变异有指导意义,而且对新型疫苗的研制及疾病的预防和控制也具有重要意义。
α-乳清蛋白是一种小分子质量(14.2ku)的酸性钙结合蛋白,几乎存在于所有的哺乳动物乳汁中。它不但是哺育后代所必需的蛋白质,同时作为调节亚基与半乳糖苷转移酶相互作用来催化乳糖的合成。最近研究发现a一乳清蛋白的不同折叠突变体还具有杀菌和诱导肿瘤细胞凋亡的功能。乳清蛋白作为乳品中重要的营养成分,其蛋白质效率、净蛋白质利用率都高于酪蛋白,是一种极易消化吸收的蛋白质。重组含α-乳清蛋白基因可以提高猪的乳
家猪乳腺不仅可以作为代替人类乳腺进行乳腺研究的模式器官,也是开发生物反应器的理想材料,对猪乳腺的研究还可以增加母猪泌乳量和提高仔猪生长速度,有助于提高养猪业的经济效益。mRNA测序是一种快捷、高效的揭示转录组信息的最新方法,它可以提供全面的转录组信息(包括未知、低丰度、变异转录本),且不需要设计基于序列信息或是二级结构信息的探针,使得对物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能。本文分别构建了
骨骼肌的生长发育与营养物质代谢功能息息相关,而胰岛素是调控营养物质代谢的重要激素。水解磷脂酰肌醇(PI)的肌醇多磷酸5-磷酸酶家族成员对细胞的代谢信号和膜运输起重要调节作用。其中包含SH2结构的肌醇多磷酸5-磷酸酶(SHIP2)能通过水解胰岛素介导的脂质第二信使PI(3,4,5)P3,负调控PI3K/Akt/mTOR依赖的胰岛素信号通路,是影响动物个体生长速度的候选基因。研究SHIP2基因在骨骼肌
ITGB1BP2(integrin beta 1 binding protein 2)编码整合素β1结合蛋白2,又称melusin,在肌细胞中特异表达。在整合素作用过程中,ITGB1BP2作为生物力学感应器,控制基因的表达和细胞的生长与存活,在肌细胞的成熟及自组织中起着重要的作用。本室在前期基因芯片研究中发现其在大白猪背最长肌中的表达量明显高于梅山猪,并获得其cDNA全长序列(GenBank登录号
肌肉生长抑制素是一类对骨骼肌生长具有负调控作用的因子,MSTN基因的缺失或突变会引起小鼠、牛等骨骼肌重量的显著增加。因此,生产MSTN基因敲除猪有望提升猪胴体瘦肉率。体细胞克隆技术是一种有效的生产基因敲除大型动物的技术手段,通过对体细胞进行基因敲除,再以中靶细胞为核供体进行体细胞克隆可以获得基因敲除动物。本研究构建了对猪MSTN基因exn3区域进行敲除的同源重组置换型打靶载体,通过对猪胎儿成纤维细
促卵泡激素(FSH)是动物垂体前叶嗜碱性细胞合成和分泌的一种糖蛋白生殖激素,它和促黄体素一起在调节性腺功能中扮演重要角色。在雌性动物中,促卵泡激素主要促进子宫内膜生长、排卵和刺激多卵泡发育。研究表明FSHβ基因是猪产仔数的主效基因。因此通过转基因小鼠模型这一强有利的工具来探讨FSH基因在生殖方面的功能。为了避开传统研究方法的弊端,利用FSH-BAC来构建转基因小鼠模型,获得外源促卵泡激素生理分泌量
骨骼肌卫星细胞是骨骼肌中位于肌细胞膜和基膜之间的具有增殖分化潜力的肌源性干细胞,负责骨骼肌的生长和骨骼肌的损伤修复。肌卫星细胞作为组织工程的种子细胞用于修复瘫痪的肌肉,对恢复肌肉的动力功能有广阔的前景和应用价值。本研究诣在建立一种简捷有效的鸡骨骼肌卫星细胞分离法培养、冻存和复苏及维持的方法,为鸡骨骼肌卫星细胞的进一步深入研究奠定基础。
TEA D1基因又名TEF-1,是一个具有TEA结构域的转录因子,可结合某些肌肉特异表达基因启动子区域的M—CAT元件,正调控或负调控基因的表达。在小鼠中,该基因在胚胎发育10.5d可以检测到表达,敲除该基因的小鼠因心肌发育缺陷于11~12d胚胎死亡。本研究是在本室邱海芳博士研究(2009)的基础上进行的,前期的研究用CHIP—on—chip的方法在全基因组调取转录因子TEAD1调控的基因,研究发