二氧化钛纳米棒微阵列对牙周膜干细胞生物学活性及光催化抗菌效应的影响

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目的:在纯钛表面制备有序排列的二氧化钛纳米棒微阵列(Ti O2 nanorod arrays,TNRs),研究对PDLSCs生物学活性及光催化的抗真菌及细菌作用,以探索新的钛种植体表面改性方法。材料与方法:以水热反应和烧结方法在纯钛(Ti)表面制备TNRs。通过SEM、TEM、AFM、X射线衍射、接触角测量及蛋白吸附观察表面形貌、粗糙度及亲水性;将PDLSCs接种至表面,观察细胞形貌及附着;CCK-8检测增殖,ALP检测、茜素红染色、RT-PCR和Western blot评价成骨分化;甲基橙光催化降解速率评价光催化活性;选择白色念珠菌、伴放线聚集杆菌(Aa)及牙龈卟啉单胞菌(Pg)作为研究对象,利用活菌计数法、结晶紫染色法、XTT染色法、CLSM分析生物膜内活死菌比例及生物膜厚度来检测紫外光照射下TNRs作为光催化剂对微生物浮游态和生物膜态的抑制;用转盘式CLSM检测光催化TNRs抗菌过程中活性氧产出。结果:在纯钛表面成功制备出TNRs,纳米棒呈致密有序状,垂直分布于Ti表面;TNRs粗糙度、亲水性和蛋白吸附性优于Ti;PDLSCs在TNRs表面粘附数量多于Ti(P<0.05);接种于TNRs的细胞形态呈多极形,细胞骨架更为明显;增殖能力、ALP活性、钙化结节及ALP、Runx2、OPN、OCN的基因和蛋白水平显著高于Ti(P<0.05)。光降解实验显示光催化TNRs对甲基橙降解呈一级反应。TNRs作为光催化剂,在接受紫外光照射后对浮游态白念、Aa和Pg表现出显著杀灭作用(P<0.01),明显降低白念生物膜的生物量及活性(P<0.01),CLSM表明TNRs能显著降低白念生物膜内的活菌数以及生物膜厚度(P<0.01);在TNRs表面形成的生物膜在光催化后死菌数显著增加(P<0.01)。转盘式CLSM检测到TNRs表面形成的白念生物膜随着光照时间增加,活性氧增加。结论:通过对纯钛进行表面改性成功制备出TNRs。该微阵列具有良好的生物相容性,有利于PDLSCs粘附和增殖,并能促进其成骨分化。紫外光催化表现出极强的抗真菌及抗细菌作用,特别是对生物膜态的致病微生物表现出显著破坏作用。活性氧的产生解释了其高效杀菌作用。因此TNRs具有良好的生物相容性、显著的促成骨作用及高效的抗真菌及细菌特性,有利于促进种植体骨结合和降低种植体周围炎的发生。
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