土茯苓组方对急性肝衰竭大鼠的保护作用的实验研究

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目的探讨土茯苓组方对D-氨基半乳糖(D-Galactosamine,D-GalN)/内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肝衰竭(Acute liver failure,ALF)大鼠的防治作用及机制。方法 40只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、土茯苓组及N-乙酰半胱氨酸组(NAC组)。正常组大鼠自由饮食,不做任何处理。模型组、土茯苓组及NAC组采用D-GalN(800mg/kg)/LPS(10μg/kg)腹腔注射,一次性造成大鼠ALF模型。其中,土茯苓组和NAC组造模前3d分别予土茯苓组方水煎液5ml/(Kg d)及NAC溶液50mg/(Kg d)灌胃[土茯苓水煎液含生药浓度2g/ml,NAC溶液浓度为1mg/ml]。以腹腔注射时间为起点,造模6h后,取心脏血检测血清谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)含量,采用酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10),并开腹取大鼠肝组织,应用ELISA分别检测肝组织均浆中Bcl-2和Caspase-3蛋白表达情况,并观察各组动物肝组织病理学改变。结果:1.肝功能:土茯苓组及NAC组大鼠血清AST、ALT、TBIL含量均明显高于正常组,低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);土茯苓组均值高于NCA组,但两者差异无统计学意义(P>0.05)。2.炎症介质:土茯苓组及NCA组大鼠血清IL-6、IL10含量均明显高于正常组,低于模型组,差异均具有统计学意义(P<0.05);土茯苓组大鼠血清TNF-α均值低于模型组,差异无统计学意义(P>0.05),而NCA组均值低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.Caspase-3蛋白表达:土茯苓组和NCA组大鼠肝组织中Caspase-3蛋白表达高于正常组,低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);土茯苓组大鼠肝组织Caspase-3蛋白表达高于NCA组,差异无统计学意义(P>0.05)。4.Bcl-2蛋白表达:土茯苓组及NCA组大鼠肝组织Bcl-2中蛋白表达明显低于正常组,高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);土茯苓组大鼠肝组织Bcl-2蛋白低于NAC组,差异无统计学意义(P>0.05)。5.组织病理学:正常组大鼠肝组织无坏死,土茯苓组及NCA组肝组织坏死程度较模型组明显减轻,土茯苓组坏死程度稍大于NCA组。结论土茯苓组方可明显减轻急性肝衰竭大鼠肝脏损伤,其与NAC对肝损伤的保护作用相当。其作用机制可能与上调Bcl-2蛋白、下调Caspase-3蛋白,从而抑制细胞凋亡,以及干预炎症因子有关。
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