【摘 要】
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原位、高时空分辨地检测细胞代谢状态是生命科学研究的一个瓶颈问题和迫切需求.利用传统的裂解、酶学、色谱或者质谱等生化分析方法来研究代谢难以实时追踪代谢物变化,更难以应用于高通量药物筛选.在先前的研究中,针对细胞内核心代谢物NADH,我们利用合成生物学方法,开发了第一代的细胞代谢荧光探针Frex,在国际上首次实现了在活细胞及各种亚细胞结构中对NADH 分子的实时动态、特异性的检测与成像.最近,我们又开
【机 构】
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生物反应器工程国家重点实验室,华东理工大学药学院,上海,邮编:200237
【出 处】
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中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议
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原位、高时空分辨地检测细胞代谢状态是生命科学研究的一个瓶颈问题和迫切需求.利用传统的裂解、酶学、色谱或者质谱等生化分析方法来研究代谢难以实时追踪代谢物变化,更难以应用于高通量药物筛选.在先前的研究中,针对细胞内核心代谢物NADH,我们利用合成生物学方法,开发了第一代的细胞代谢荧光探针Frex,在国际上首次实现了在活细胞及各种亚细胞结构中对NADH 分子的实时动态、特异性的检测与成像.最近,我们又开发了可同时检测NAD+、NADH及其比率的第二代细胞代谢荧光探针SoNar.SoNar 具有高灵敏度、高亮度和巨大动态范围等特性,就像火眼金睛一样,可测定癌细胞与正常细胞的微细代谢差异,真正实现了在活细胞和活体动物水平对细胞代谢状态的高时空分辨检测和成像.通过在活细胞水平建立高通量化合物筛选的系统研究方法,发现了几百个调节细胞代谢活性的化合物,鉴定了一种结构新颖的NQO1 底物KP372-1,可高效杀伤特异高表达NQO1 酶的癌细胞.KP372-1 比目前已进入临床Ⅱ 期依赖NQO1的经典抗癌化合物β-lapachone 具有更高的口服利用度、更长的药物作用半衰期和更低的药效浓度.
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