大黄鱼雄激素受体基因的克隆与分析

来源 :2011年中国水产学会学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hzjojo
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  本研究在实验室构建的大黄鱼(Larimichthys crocea)性腺EST数据库的基础上筛选获得雄激素受体(Nuclear Androgen Receptor, nAR)基因片段,在此基础上通过SMART RACE技术获得了大黄鱼nAR 2840bp的全长cDNA序列, 2250bp的开放阅读框编码750个氨基酸.实时定量PCR分析显示,nAR在雌雄大黄鱼各组织器官中均有表达,在雌雄肝脏和性腺中表达量最高.nAR在胚胎发育的囊胚期表达水平最高,其次是多细胞期.除多细胞期和囊胚期以外的胚胎各发育时期nAR基因表达水平均较低.原位杂交技术分析显示nAR在精子发生过程中的分布较广泛,在精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子中均有表达,且在精原细胞细胞核以及初级精母细胞中杂交信号较强,其他细胞中杂交信号则较弱.nAR mRNA在卵子发生过程中的第Ⅰ、第Ⅱ和第Ⅲ时相卵母细胞中主要定位在细胞质,在第Ⅳ时相卵母细胞及退化期卵母细胞中主要定位在其周围的滤泡细胞中,在卵母细胞细胞质中也存在杂交信号.这些研究结果为进一步阐明大黄鱼性腺发育的分子机制提供了参考.
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