【摘 要】
：
以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增mpb64基因,纯化PCR产物并与pDM18-T载体连接、转化,经酶切及核苷酸序列鉴定为正确后,酶切产物亚克隆到原核表达载体pET30a(+)的Kp
【机 构】
：
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江,哈尔滨,150001
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会
论文部分内容阅读
以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增mpb64基因,纯化PCR产物并与pDM18-T载体连接、转化,经酶切及核苷酸序列鉴定为正确后,酶切产物亚克隆到原核表达载体pET30a(+)的KpnⅠ/EcoRⅠ位点,构建重组表达质粒rpET64,转化到大肠杆菌DE3内,以IPTG进行诱导,终浓度为1mmol/L,诱导产物进行SDS-PAGE电泳.结果表明,PCR方法成功扩增出mpb64基因,核苷酸序列测定验证了其正确性,重组表达质粒表达的rMPB64融合蛋白相对分子量为30.4kD,与实测相符.牛分枝杆菌rMPB64的成功表达为牛结核病的诊断及新型疫苗的研究奠定了基础。
其他文献
电视广告建立品牌忠诚的无意识弗洛伊德曾经说过,人类有史以来曾经受过三次重大耻辱,一次是哥白尼的日心说,将人类从主宰宇宙的神坛上拉了下来;第二次是达尔文的进化论,将人
使用灭活的SARS病毒免疫SPF鸡,定期收集鸡蛋.用水稀释法提取鸡蛋中的IgY,将其进一步纯化,制备了抗SARS病毒卵黄抗体.经SDS-PAGE、Western-blot及中和试验结果表明纯化后的卵
将本课题组构建的共表达FMDV复合多表位基因以及猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTA2-OAT以及DNA疫苗pVRI-OAT,分别以vUTA2-OAT/vUTA2-OAT、pVRI-OAT/vUTA2-OAT
为了解我国Holstein奶牛群中牛白细胞粘附缺陷病的携带情况,使用RT-PCR技术扩增CDl8基因片段后,用TaqⅠ内切酶对扩增产物进行酶切的方法检测了350头Holstein奶牛,结果有7头奶
北京凯恩帝数控技术有限责任公司是从事数控系统及工业自动化产品研制、生产及营销服务一条龙的科技型股份制公司,是北京市科委批准的高新技术企业。凯恩帝有多种系列的数控
腮腺在消化中的地位和作用,决定了它具备研制生物反应器和进行抗病育种研究的良好条件.猪PSP基因在腮腺中特异性表达[5],但PSP在不同发育期腮腺中的表达量尚无报道.本研究利
本文总结对14日龄早期断奶仔猪在消化器官及其内容物重、血清生化指标、内分泌、免疫功能、体内电解质平衡、胃肠道内容物pH与微生物区系、消化酶活性、小肠黏膜形态结构等方
目的 研究铝对小鼠感觉运动行为和生活习性的影响.方法健康雄性ICR小鼠经饮水中加入AlCl3染毒,3个剂量组分别为10、50、300mg·kg-1·d-1.通过自主活动、抓力、抓绳、平衡木、囤积食物、筑巢等实验观察铝对小鼠感觉运动行为和生活习性的影响.结果10、50、300mg·kg-1·d-1染铝组小鼠自主活动频数分别为(81.53±8.97)、(71.67±8.37)、(66.73±6.96)
将丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)脂蛋白Q(LppQ)N末端基因克隆至原核表达载体pET32a中,经酶切、PCR、测序证实获得了重组表达质粒,转化EscherichiacoliBL21(DE3)菌,经IPTG诱
朊病毒病(又称传染性海绵状脑病)的病原是致病型朊蛋白(PrPSc),聚集在牛脑中能够引发牛海绵状脑病(BSE).利用自制的单抗4C11和国外同类单抗进行免疫组织化学(IHC)的比较染色,