【摘 要】
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目的 观察串珠素在宫内发育迟缓(IUGR 组)和正常对照(CON 组)大鼠肾脏发育中的时空表达规律;及其与两组大鼠肾脏发育各时期生肾区细胞凋亡和增殖水平变化的关系;初步探讨串珠在IUGR大鼠肾脏发育程序化中的作用.方法 (1)通过孕期全程"低蛋白(6 ％)等热卡"饮食建立IUGR 大鼠模型,应用盐酸浸渍法测定4周龄两组大鼠单侧肾脏肾小球数;(2)Real-Time PCR 检测肾脏发育不同时间点(
【机 构】
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复旦大学附属儿科医院肾脏风湿科 201102
【出 处】
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中华医学会肾脏病学分会2014年学术年会
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目的 观察串珠素在宫内发育迟缓(IUGR 组)和正常对照(CON 组)大鼠肾脏发育中的时空表达规律;及其与两组大鼠肾脏发育各时期生肾区细胞凋亡和增殖水平变化的关系;初步探讨串珠在IUGR大鼠肾脏发育程序化中的作用.方法 (1)通过孕期全程"低蛋白(6 ％)等热卡"饮食建立IUGR 大鼠模型,应用盐酸浸渍法测定4周龄两组大鼠单侧肾脏肾小球数;(2)Real-Time PCR 检测肾脏发育不同时间点(胚胎13 天、15天、18 天、新生期、生后1 周、生后4 周)IUGR 组和CON 组串珠素的mRNA 转录水平;(3)在各个时间点应用免疫组化法检测串珠素在肾组织的表达,在蛋白质水平明确其表达部位及水平;(4)分别应用Ki-67 和TUNEL 法标记增殖和凋亡细胞,检测两组肾发育不同时间点(胚胎18 天、新生期、生后3 天、生后1 周)生肾区细胞增殖和凋亡水平变化;结果 (1)IUGR 组新生鼠体重显著低于CON 组(5.01±0.35 vs 6.71±0.42g)且肾单位数目较正常大鼠减少(26708±213 vs 36666±2889,P＜0.05);(2)胚胎期串珠素的mRNA 转录水平总体上随时间推移逐渐增高,生后4 周又降至较低水平;胚胎18 天(E18)及新生鼠(P0)IUGR 组转录水平均低于CON 组(E18:0.47±0.082 vs 0.76±0.164,P＜0.001;P0:0.41±0.043 vs 0.55±0.094,P＜ 0.05);(3)串珠素在胚胎期主要表达在生肾区输尿管芽周围及间充质细胞基质,E18(0.019±0.0048 vs 0.044±0.0086,P＜0.001)和P0(0.0034±0.0016 vs 0.011±0.0037,P＜0.05)IUGR 组蛋白表达水平低于CON 组;(4)肾脏发育不同时期细胞凋亡和增殖均主要位于生肾区,肾脏发育中期(E18)IUGR 组胎鼠生肾区细胞增殖水平显著低于CON 组(44.17±7.3 vs 76.32±7.6,P＜0.001);P0 时IUGR 组(315.18±55.7 vs 157.1±40.32,P＜0.001)和生后1 周(77.87±11.11vs 23.69±5.47,P＜0.001)生肾区凋亡水平显著高于CON 组;结论 (1)Perlecan 在正常胚胎肾脏发育各期表达量逐渐增高,生后降至较低水平;Perlecan 在IUGR大鼠肾脏发育中期(E18、P0)表达量较正常大鼠降低;(2)宫内发育迟缓大鼠肾脏发育中期(E18、P0)生肾区细胞增殖与凋亡动态平衡异常:IUGR 组E18 时生肾区细胞增殖较正常大鼠减少而P0时细胞凋亡增多.
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