【摘 要】
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[目的]构建及鉴定秀丽隐杆线虫OATP同源基因K02G10.5 RNAi的突变体。[方法]利用细菌介导的RNAi技术构建突变体，并利用单、双酶切和质粒PCR扩增鉴定目的基因是否成功插入载体，最后通过Real-time PCR观察K02G10.5在mRNA水平上的表达，并比较MC-LR对突变体和野生型N2运动行为能力的影响。[结果]单、双酶切和PCR扩增均成功鉴定出重组质粒中插入了与目的基因大小一致
【机 构】
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东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室,江苏 南京 210009 东南大学生命科学研究院
【出 处】
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第九届全国环境与职业医学研究生学术研讨会
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[目的]构建及鉴定秀丽隐杆线虫OATP同源基因K02G10.5 RNAi的突变体。[方法]利用细菌介导的RNAi技术构建突变体，并利用单、双酶切和质粒PCR扩增鉴定目的基因是否成功插入载体，最后通过Real-time PCR观察K02G10.5在mRNA水平上的表达，并比较MC-LR对突变体和野生型N2运动行为能力的影响。[结果]单、双酶切和PCR扩增均成功鉴定出重组质粒中插入了与目的基因大小一致的片段，测序结果也显示插入片段为目的基因K02G10.5，Real-timePCR结果显示K02G10.5表达下降，但未观察到MC-LR对突变体的影响与野生型N2有差异。[结论]应用细菌介导的RNAi方法成功构建了OATP同源基因K02G10.5表达下降的突变体。观察MC-LR对突变体运动行为的影响，未发现与野生型N2有区别。
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