Scriptaid对绵羊体细胞核移植胚胎发育的影响

来源 :第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pigyu
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本文以绵羊为研究对象,用切剖法获得卵母细胞,收集卵丘细胞一卵母细胞复合体,进行成熟培养。COCs体外成熟19h后,去除周围卵丘细胞并将其离心洗涤,培养2代后用含有不同浓度Scriptaid的培养液进行接触抑制处理,然后用0.25%胰蛋白酶消化处理2-3min,用移液枪吹打成单个细胞。将卵母细胞在显微操作仪下去除第一机体及周围的少量胞质,并注入卵丘细胞,进行融合。随后置于培养液中培养3h后观察融合结果,再对融合后的胚胎进行激活。将胚胎在含有不同浓度Scriptaid的发育液中培养。然后对不同时期的胚胎进行免疫染色。研究表明:采用0.21μmo1/L的Scriptaid分别处理绵羊卵丘细胞和核移植胚胎后能提高胚胎体外发育能力;但采用0.2μmo1/L Scriptaid同时处理绵羊卵丘细胞及胚胎时所得胚胎体外发育能力低于单独处理供体卵丘细胞或胚胎时的效果;添加Scriptaid可显著提高绵羊核移植胚胎1一细胞、2一细胞、4一细胞和8一细胞期H4K12乙酞化水平。
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