【摘 要】
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目的:基于柱前衍生-正相高效液相色谱法,建立兔血清中游离肉毒碱的测定方法。 方法:实验于2006-9/2007-4在南京军区南京总医院检验科进行。血清样品经乙腈~甲醇沉淀蛋白、衍
【机 构】
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南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所检验科,南京,210002
【出 处】
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2007年全国感染性疾病实验室诊断研讨会
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目的:基于柱前衍生-正相高效液相色谱法,建立兔血清中游离肉毒碱的测定方法。
方法:实验于2006-9/2007-4在南京军区南京总医院检验科进行。血清样品经乙腈~甲醇沉淀蛋白、衍生化反应后,以Lichrospher SiO2为固定相,乙腈~柠檬酸缓冲液为流动相进行色谱等度分离,260 nm波长下定量检测。用该方法测定补充和未补充肉毒碱的高脂血症兔血清游离肉毒碱的含量。
结果:在所建立的分析条件下,肉毒碱衍生产物的色谱保留时间约为12.5 min,峰形清晰对称,与样品中其余内源性物质分离完全,定量准确,衍生化反应产物在100分钟内测定稳定(RSD=2.71%)。肉毒碱在0~200 μmol/L浓度范围线性良好,其线性回归方程和相关系数分别为y=908.31x+1009.6,r2=0.9998.样品测定批间(n=7)及平均批内(n=5)测定的相对标准偏差分别为3.04%和2.04%,平均测定回收率为96.97%。补充及未补充肉毒碱的高脂血症新西兰兔血清中游离肉毒碱含量分别为65.86±5.50 μmol/L和18.17±5.17μmol/L.
结论:建立了基于柱前衍生的高效液相色谱法检测兔血清中游离肉毒碱含量。该法快速准确,为进行肉毒碱相关生物学功能研究奠定了方法学基础。
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