Toll样受体是目前发现的一类重要的模式识别受体(PRRs),通过识别病原相关分子模式引起天然免疫反应。研究表明,人类Toll样受体3的配体是dsRNA。在低等的有脊椎动物中TLR3可以识别细菌的相关分子模式而不仅仅是病毒。本实验的目的在于探究斜带石斑鱼的TLR3与海水白点病的病原体—刺激隐核虫所引起的宿主免疫反应的相关性。本研究利用简并PCR和RACE技术从斜带石斑鱼中克隆得到TLR3的cDNA全长。经序列分析斜带石斑鱼的TLR3 cDNA全长2937bp,包括107bp的5’非编码区、100bp的3’非编码区和2730bp的开放阅读框架。开放阅读框架编码909个氨基酸的多肽。同源性结果分析显示其与大马哈鱼中的TLR3相似度达60%。SMART软件分析斜带石斑鱼TLR3包含典型的Toll样受体结构:富含亮氨酸的重复序列、跨膜结构域和胞内的TIR结构域。通过半定量PCR技术,发现在健康的斜带石斑鱼中TLR3在脾脏、头肾、体肾、垂体和前脑均高表达。为了研究TLR3与刺激隐核虫所引起的鱼类免疫反应的相关性,本研究采用实时荧光定量PCR技术,检测被刺激隐核虫感染6h、1d、2d、3d、5d、7d、14d后TLR3表达量的变化。结果发现:相对与对照组,在实验组中头肾中TLR3的表达量水平14天内均下调,而在皮肤和腮中感染3天后TLR3表达量下调,但之后又上调并分别在7d和5d达到峰值。结果说明在刺激隐核虫引起的斜带石斑鱼免疫反应中,TLR3具有一定的免疫功能。