被动皮肤过敏反应,亦称PCA反应(Passive Cutaneous Anaphylaxis,PCA)。是利用与同种或异种动物组织有结合性的抗体所引起的局部过敏反应,来检验抗体或抗原的高敏感度的方法。通常局部给药发挥全身作用的药物(如注射剂和透皮吸收剂等)需考察被动皮肤过敏试验。通常选大鼠,可用小鼠,有时根据试验需要用豚鼠。本安评中心多用豚鼠进行实验,为了提高实验质量,本中心尝试提高动物等级,改用SPF级豚鼠进行PCA实验,实验结果显示SPF级豚鼠阳性对照组致敏率仅为33%~50%,SPF级豚鼠用于PCA实验阳性反应率过低,在本中心实验条件下不能用于被动皮肤过敏实验。目的:探讨在本中心实验条件下用豚鼠进行PCA的方法学。方法:(1)抗体的制备:SPF级Hartley豚鼠16只,分成4组,每组4只,即供试品低剂量组、供试品高剂量组、生理盐水阴性对照组和卵清白蛋白阳性对照组,雌雄各半,隔日腹腔注射致敏共3次,给药量0.5ml/只,末次致敏后14d由腋下动脉放血,2000转/分,离心10min,分离抗体血清。(2)被动致敏和激发:取SPF级Hartley豚鼠24只,随机分成4组,每组6只,雌雄各半,将上述各组抗体血清用生理盐水稀释成1:2、1:4、1:8、1:16、1:32,在动物背部预先去毛8×11cm~2面积,分别皮内注射各对应组的抗血清0.1ml,24h后,各组静脉注射与致敏剂量相同的激发抗原加0.5ml的0.5%伊文思兰染料共1ml,激发30min后处死各组动物,剪取背部皮肤,测量皮肤内层的斑点大小,并对蓝斑进行拍照,直径在5mm以上者判定为阳性,不规则斑点的直径为长径与短径之和的一半。结果:卵清白蛋白阳性对照组的动物2/6出现明显的蓝斑,且蓝斑直径均大于5mm,致敏率为33%,阳性反应率过低,本实验结果无效。讨论:普通级豚鼠用于被动皮肤过敏实验时,阳性对照组致敏率为100%,且蓝斑明显,蓝斑大小与抗体血清浓度成正比,改用SPF级豚鼠进行实验后,重复实验3次,阳性对照组致敏率为33%~50%,蓝斑不明显,且与动物体重、性别均无相关性,故在本中心实验条件下,SPF级豚鼠不能用于被动皮肤过敏实验。