【摘 要】
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目的：构建含有人腺病毒3型、7型、11型、14型及55型抗原表位的嵌合蛋白,并对其进行免疫学研究.
方法：利用ANTHEWIN等软件,通过计算机分析人腺病毒3型、7型、11型、14型及55
【机 构】
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华东生物医药研究所,南京210002;中国药科大学生命科学与技术学院,南京210009华东生物医药研究所,南京210002华东生物医药研究所,南京210002;南京医科大学基础医学院,南京210005
【出 处】
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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会
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目的：构建含有人腺病毒3型、7型、11型、14型及55型抗原表位的嵌合蛋白,并对其进行免疫学研究.
方法：利用ANTHEWIN等软件,通过计算机分析人腺病毒3型、7型、11型、14型及55型六邻体蛋白的氨基酸序列,分别筛选出各类型腺病毒六邻体蛋白中具有强抗原性片段.利用基因工程方法将筛选所得蛋白片段的核酸序列进行串联,并将构建所得的重组序列插入载体pET28a(+)中,利用原核表达系统对构建的嵌合蛋白进行表达纯化.将纯化所得的嵌合蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,制备抗血清.利用ELISA法检测嵌合蛋白的抗原性及免疫原性.
结果：纯化所得的嵌合蛋白浓度达到0.5mg/mL,具有较高的纯度.
结论：经4次免疫,小鼠抗血清效价达到640000,同时ELISA法证明嵌合蛋白具有较好的抗原性及免疫原性.本实验为进一步研制腺病毒疫苗、单克隆抗体以及诊断试剂奠定了基础.
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