Arthrobacter nitroquajacolicus HW08降解SW酶的特性研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物毒物学分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hqc12322967
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采用微生物酶制剂降解疯草中的毒性成分一苦马豆素(SW)是一种可开发利用的去除毒素的方法.本实验室从埋置疯草的黄花棘豆中筛选到1株能降解SW的菌株Arthrobacter nitroquajacolicus HW08.进一步研究发现HW08菌的胞内酶能够降解SW.鉴于此,本文对SW降解酶的特性进行了研究.结果发现SW降解酶最适降解温度30℃,保温80 min相对酶活力大于90%,但超过60℃保温10min即可失活;pH在7.0~10.0时,酶的活力较稳定,pH为8.0时,相对酶活力最高;选用的15种金属离子中,只有Co2+对该酶具有激活能力;化学试剂PMSF、β-巯基乙醇、EDTA可作为SW降解酶的抑制剂,Triton X-1 00和BSA对可做为激活剂;应用TLC方法检测氨基酸成分发现SW降解酶中可能含有Ser、Hyp、Tyr、Thr、Lys、His、Orn;经SDS-PAGE检测,SW诱导前后存在一条明显的特异性条带,分子量约为61 kD;SW降解酶具有降解底物多样性的特点,除能够降解SW外,还具有降解邻苯二酚、邻苯二甲酸、邻苯二胺的能力.通过上述对SW降解酶的特性研究为进一步分离纯化提供了参考依据.苦马豆素(Swainsonine,SW)是一种生物碱类植物毒素,主要存在于疯草中.这类植物在中国西北部地区草场分布广泛,动物大量采食后可引起以神经中毒症状为特征的慢性中毒性疾病,严重者导致动物死亡,给畜牧业生产带来了重大经济损失.疯草虽然是一类危害家畜健康的毒草,但从牧草学和营养学角度看,疯草的营养成分近似于优良苜蓿,可以将其视为一种潜在的牧草资源.当前,生物降解有毒有害化合物的方法被认为是一种比较经济、有效的措施.生物降解酶因具有高效、无刺激等特点,成为可开发利用的去除毒素的方法.为将疯草变为可食用的牧草资源,可采用生物降解方法进行处理.这一过程主要可通过微生物的分解作用,利用微生物的酶系活动分解SW来实现.如将生物降解技术运用到SW降解的过程中,不但使动物疯草中毒的问题得到解决,而且将对畜牧生产的提高,生态环境的平衡起到重要作用.
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