【摘 要】
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为探讨急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)发病机制中炎症介导肺泡上皮细胞氧化损伤时氧化相关基因烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NADPH oxid
【机 构】
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广州军区广州总医院呼吸科,510010
【出 处】
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2013年第十二届全军呼吸内科专业学术会议
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为探讨急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)发病机制中炎症介导肺泡上皮细胞氧化损伤时氧化相关基因烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NADPH oxidase 1,Nox1)的转录调控机制,并阐明以TNF-α为代表的细胞因子与Nox1基因、活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的相互关系以及转录因子SP1参与Nox1表达调控的作用.本实验室用不同浓度(0ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml)的TNF-α刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549 24小时,RT-PCR检测Nox1及SP1mRNA水平,Western-blot检测Nox1及SP1蛋白表达,DCFH-DA探针法检测ROS水平;TNF-α(50ng/ml)刺激A549细胞,siRNA分别沉默Nox1及SP1,DCFH-DA探针法检测Nox1沉默后的ROS水平,RT-PCR检测SP1沉默后的Nox1mRNA水平.结果发现,TNF-α刺激能上调A549细胞Nox1及ROS表达,且与TNF-α呈浓度依赖关系,Nox1沉默能显著下调A549细胞内ROS水平;TNF-α刺激能上调A549细胞SP1表达,SP1沉默后Nox1mRNA表达水平降低.本研究结果提示Nox1是TNF-α介导的肺泡上皮细胞氧化损伤中内源性ROS的重要催化酶;转录因子SP1参与了TNF-α介导肺泡上皮细胞氧化损伤中Nox1基因的转录调控:SP1对Nox1转录调控现象的发现为ARDS中炎症继发氧化应激损伤的病理生理机制研究奠定基础.
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