【摘 要】
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目的 生物体内硫化氢主要以H2S分子和HS-离子形式存在,目前关于体内硫化氢浓度报道差异很大.本研究拟建立一种快速、灵敏、可靠的液相色谱-串联质谱法测定人全血中硫化氢浓度,为硫化氢生物学机制研究提供有力支撑.方法 先通过碱化血浆(pH 9.5)使全血中H2S分子以HS-形式存在,然后采用巯基捕获剂MBB与HS反应生成较为稳定的衍生产物SDB.随后全血样品经有机试剂蛋白沉淀处理后,使用资生堂CAPC
【机 构】
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复旦大学药学院药理教研室,张衡路826号,上海,201203 上海市肺科医院,政民路507号,上海
【出 处】
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第三届全国气体信号分子硫化氢研讨会
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目的 生物体内硫化氢主要以H2S分子和HS-离子形式存在,目前关于体内硫化氢浓度报道差异很大.本研究拟建立一种快速、灵敏、可靠的液相色谱-串联质谱法测定人全血中硫化氢浓度,为硫化氢生物学机制研究提供有力支撑.方法 先通过碱化血浆(pH 9.5)使全血中H2S分子以HS-形式存在,然后采用巯基捕获剂MBB与HS反应生成较为稳定的衍生产物SDB.随后全血样品经有机试剂蛋白沉淀处理后,使用资生堂CAPCELL PAK C18柱(2.0 × 100mm I.D.,3μm),以乙腈-0.1％甲酸为流动相,等度洗脱.采用电喷雾电离源,多反应监测模式(MRM),检测衍生产物SDB反应离子对m/z415→m/z 223,结果使用Analyst软件进行处理.结果 全血中内源物对测定无干扰,测定人全血中硫化氢的线性范围为40-4000nM,检测下限为10 nM.每一样品分析时间小于2 min.采用该方法对数名肺心病患者全血进行测定,硫化氢浓度为1.5±0.3μM.结论 该方法选择性强,灵敏度较高,对全血中硫化氢(包括HS和H2S)能快速、准确检出,并能进一步运用于组织中硫化氢的测定.肺心病患者全血中硫化氢浓度在μM级附近.
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