【摘 要】
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目的：本文通过比较携带BRCA1的RING或BRCT功能区内位点突变的HCC 1937乳腺癌细胞系对不同形式DNA损伤的应答反应,探讨在DNA损伤反应中BRCA1的RING和BRCT两功能区的作用. 方
【出 处】
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第十三届全国劳动卫生与职业病学术会议
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目的：本文通过比较携带BRCA1的RING或BRCT功能区内位点突变的HCC 1937乳腺癌细胞系对不同形式DNA损伤的应答反应,探讨在DNA损伤反应中BRCA1的RING和BRCT两功能区的作用.
方法：选择RING和BRCT功能区内与肿瘤发生相关的突变位点C64G和P1749R进行研究,应用BRCA1缺欠的HCC1937细胞系建立稳定表达C64G位点突变(C64G)、P1749R位点突变(P1749R)、野生型BRCA1 (wtBRCA1)以及GFP空载体(GFP空载体对照)细胞系.分别给与放射(ionizing radiation,IR)、丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)和紫外线(ultraviolet,UV)处理各细胞系以造成不同的DNA损伤模型:DNA双链断裂、DNA分子交联以及嘧啶二聚体/6-4光产物的形成.在这些不同的DNA损伤条件下,通过3H-TdR掺入和细胞克隆形成实验手段研究细胞3H-TdR掺入量和细胞存活率的变化.
结果：3H-TdR掺入实验表明,在X射线(2Gy、4Gy、6Gy)、MMC(0.2μg/ml、1μg/ml、5μg/ml)或UV(2J/M2、4 J/M2、6J/M2)作用下,与野生型BRCA1细胞系相比,C64G或P1749R位点突变细胞系与BRCA1缺欠细胞系一样,均呈现出3H-TdR掺入量的明显降低(P＜0.05);细胞克隆形成实验结果显示,在6GyX射线、2μg/ml MMC或6J/M2 UV作用下,与野生型BRCA1细胞系相比,C64G或P1749R位点突变的细胞系也呈现细胞存活率的明显降低(P＜0.01).
结论：N-末端RING或C-末端BRCT功能区的位点突变均可造成细胞对不同毒作用损伤的敏感性升高,提示这两个功能区,特别是其C64和P1749位点可能参与了不同的DNA损伤修复过程并起到关键的调控作用.
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