【摘 要】
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目的：探讨LMP-1和LMP-3双基因共转染骨髓间充质干细胞的表达情况.方法：采用人工设计合成人LIM矿化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)和LIM矿化蛋白-3(LIM minera
【机 构】
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四川省内江市第一人民医院骨科,四川641000
【出 处】
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2015成都国际骨科论坛暨四川省医学会第19次骨科学术会议
论文部分内容阅读
目的：探讨LMP-1和LMP-3双基因共转染骨髓间充质干细胞的表达情况.方法：采用人工设计合成人LIM矿化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)和LIM矿化蛋白-3(LIM mineralization protein-3,LMP-3)基因片段,分别与质粒pEGFP-N2连接,经酶切、测序鉴定后.用脂质体包裹转染骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs),按转染情况分为五组：未转染组(A组)、转染空载体组(B组)、转染LMP-1基因组(C组)、转染LMP-3基因组(D组)、LMP-1与LMP-3双基因共转染组(E组).采用RT-PCR和Western Blot检测LMP-1和LMP-3的表达.结果：酶切及测序证实真核表达质粒pEGFP-N2-LMP-1和pEGFP-N2-LMP-3构建成功.共转染组(E组)可同时较高水平表达LMP-1和LMP-3分子.对RT-PCR及Western Blot检测结果行灰度值测量并行统计学分析显示：LMP-1 mRNA及蛋白水平的表达,五组间差异有统计学意义(P＜0.05),但E组与C组的差异无统计学意义(P＞0.05)；LMP-3 mRNA及蛋白水平的表达,五组间差异有统计学意义(P＜0.05),且E组与D组差异也有统计学意义(P＜0.05).结论：双基因共转染的骨髓间充质干细胞能在体外同时表达LMP-1与LMP-3,为基因修复骨缺损带来新思路.
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