双组分混合物中目标蛋白在离子交换层析中分离纯化策略的研究(Ⅰ)

来源 :第五届全国化学工程与生物化工年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fibiya
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  本文以双组分混合物中目标蛋白的分离纯化为模型,研究了目标蛋白在离子交换层析柱上的分离纯化策略,以期从简单的分离模型推广到普遍适用的模型,解决蛋白质混合物的实际分离问题,为中试和规模化分离纯化目标蛋白提供了高效和可行的方案。分别以CM Sepharose Fast-Flow阳离子交换层析和Sources TM30Q阴离子交换层析分离纯化溶菌酶和猪血红蛋白为例,对蛋白质的活性、纯度、回收率、进料量等操作因素进行了分离条件的优化,验证了这种分离纯化策略的可行性,并在此基础上,采用DEAF Sepharose Fast-Flow阴离子交换层析分离纯化了猪血红蛋白单体粗品,纯化后的猪血红蛋白单体经过高效液相色谱检测其纯度在98%以上,蛋白质收率在94%以上,节省时间在30min以上。高铁血红蛋白含量低于3.4%,并为人血液替代品项目提供了高纯原料。
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