研究背景及目的：先天性心脏病(CHD)是较常见的一种生后缺陷，严重影响小儿健康。心脏的发育是一个复杂的过程，涉及多种基因在不同时间和空间上的顺次精确表达，并受多种转录因子的调控。近年来研究发现某些心脏发育相关基因的正常表达是心脏正常发育及形成的关键。因此，研究心脏发育相关基因的表达有助于揭示人体心脏发育机理和先心病发生机制。本研究以GAPDH作为内对照对先心病患儿(房间隔缺损、室间隔缺损、法洛氏四联征各10例)和6例非先心病患儿(对照组)心肌标本进行逆转录.实时荧光定量PCR分析，观察NKX2.5、GATA4这两个心脏发育相关基因在mRNA水平上的差异，从其转录水平上探讨NKN2.5、GATA4与先心病的发病关系，深化先心病形成的分子机制。 　　方法：30例CHD患儿，均来自儿童医院病房。患几年龄4月-8岁，平均年龄3.5岁，CHD诊断依据①典型的临床表现； ②心脏彩色超声心动图和心脏手术证实。全部病例包括室间隔缺损10例，房间隔缺损10例，法洛式四联症者10例，在手术过程中留取心肌组织，-70℃冻存。6例非先心病患儿作为对照，均没有先心病病史和遗传病家族史。年龄4月～9岁，平均年龄3.8岁。留取各病例心肌组织，提取心肌组织总RNA，逆转录为eDNA。应用美国Whitehead生物医学研究所基因研究中心的Web服务器提供的软件组中的Primer 3软件按照引物设计原则进行引物设计，用来扩增心肌组织NKX2.5、GATA4、GAPDHmRNA目的片段。引物长度18-22bp，Tm值为56～64.6℃之间，扩增片段长度163—240bp。应用双标准曲线、实时荧光定量PCR法比较NKX2.5、GATA4基因的mRNA水平在正常对照和CHD病人之间是否存在统计学差异。 　　结果：CHD患者中存在NKX2.5/GAPDH比值的差异，ASD、VSD组和TOF组显著低于对照组，提示：ASD、VSD和TOF组的NKX2.5mRNA表达较非CHD组显著降低；CHD患者中存在GATA4/GAPDH比值的差异，ASD显著高于对照组，VSD组显著低于对照组，TOF组与对照组无差别，提示与非CHD组比较，CHD病人存在GATA4基因mRNA水平量的差异；ASD组的GATA4mRNA表达显著增高；VSD组的GATA4mRNA表达显著降低；而TOF组的GATA4mRNA表达无变化。 　　结论：人心肌组织中有心脏发育相关基因NKX2.5和GATA4mRNA的表达；心肌组织中NKX2.5mRNA含量降低与CHD相关：GATA4mRNA在不同CHD中表达量不同，即NKX2.5mRNA和GATA4mRNA异常表达与CHD具有相关性，可能是CHD发病的另一种潜在分子机制。