【摘 要】
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以酵母Lipomyces starkeyi Y215(Y-215)和Saccharomyces cerevisiae 2.399(Y-2.399)为亲本,通过原生质体融合技术构建内醚糖(levoglucosan,1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖)乙醇发
【机 构】
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清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点实验室(北京)
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以酵母Lipomyces starkeyi Y215(Y-215)和Saccharomyces cerevisiae 2.399(Y-2.399)为亲本,通过原生质体融合技术构建内醚糖(levoglucosan,1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖)乙醇发酵的酵母融合株.根据两株亲本菌的生理特性,确立了以内醚糖为唯一碳源和37℃的培养条件筛选融合子的体系.酵母Y-2.399和Y-215培养8h后,在37℃下,分别用1％蜗牛酶和2％蜗牛酶+2％纤维素酶,酶解10min和4h,能获得各自的原生质体.在30％(w/v)PEG6000和0.01mol/L CaCl<,2>诱导融合下,获得了数株融合子.经30~35代的连续传代培养,纯化分离,最终得到较为稳定的融合子菌株F2-9-7和F1-9-10.其中,F2-9-7对内醚糖有微弱的乙醇发酵能力,而F1-9-10没有乙醇发酵能力.
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