人ⅡA型磷脂酶A2衍生多肽M17杀菌作用的研究

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目的:研究和比较人ⅡA型磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)衍生多肽M17,P26和N1-11对不同细菌在体外的杀菌效应。方法:根据人ⅡA型PLA2氨基酸顺序分别设计合成3个肽分子M17(p51-67),P26(p99-124),N1-11(p1-11)。采用琼脂铺板计数法测定杀菌活性,将不同浓度衍生肽分别与革兰阳性菌(G+)金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、屎肠球菌和革兰阴性菌(G-)大肠杆菌、绿脓杆菌、鲍曼不动杆菌在37℃孵育2.5 h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18~24 h,记录每一琼脂板上的菌落数(CFU),并计算多肽作用后的杀菌率。结果:ⅡA型PLA2M17对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌的杀菌回归方程分别为:Y=1.464X+3.795(ED506.65 mg·L-1),Y=1.152X+3.419(ED5023.57 mg·L-1),Y 0.836X+3.832(ED5024.95mg·L-1);对大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、绿脓杆菌的杀菌回归方程分别为:Y=0.877X+4.054(ED5012.00 mg·L-1),Y=1.094X+3.371(ED5030.83 mg·L-1),Y=1.027X+3.626(ED5021.77 mg·L-1);M17肽分子对G+菌与G-菌均有较强的杀菌活性。P26和N1-11对金黄色葡萄球菌的杀菌回归曲方程分别为:Y=0.915X+2.766(ED50276.39 mg·L-1),Y=1.389X+1.668(ED50250.52 mg·L-1),P26和N1-11对大肠杆菌的杀菌回归方程为:Y=1.327X+1.437(ED50484.18 mg·L-1),Y=0.881X+2.903(ED50240.02 mg·L-1);N1-11和P26对G+菌有较强的杀菌活性,但对G-菌杀菌活性较弱。M17肽分子对金黄色葡萄球菌的杀菌活性强于P26及N1-11,M17肽分子对大肠杆菌的杀菌活性明显强于P26及N1-11。结论:衍生自人ⅡA型PLA2保守区域17个氨基酸残基的肽M17对G+菌和G-菌均有较强的杀菌活性,这可能与M17肽分子更易于与细菌结合并发挥作用有关。
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