环保试剂在冷冻切片中的应用

来源 :2018年浙江省病理技术学术年会论文汇编 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhongming328
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在传统的冷冻切片制片过程中,用甲醇固定,二甲苯透明的冷冻切片虽然技术稳定,质量较好,但由于二甲苯有毒、有害、易挥发,不仅污染环境,而且对病理技术人员的身体健康危害严重。因此,寻找一种安全有效的环保试剂替代传统试剂具有重要意义。本文将宁波同盛环保试剂应用于冷冻切片固定和染色透明中,收到了理想效果。1材料与方法材料选取本院手术送检的各类新鲜标本,包括乳腺、甲状腺、肺、淋巴结、皮肤、肾、卵巢等。试剂环保固定液,环保透明液(宁波同盛生物科技有限公司生产);传统固定液(我院现用甲醇),HE染液等。方法新鲜标本取材后OCT包埋,行常规冷冻切片,厚度在5μm左右,每个样本切片2套。传统试剂入甲醇固定液后依次入苏木精染液,分化,返蓝,伊红,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。环保试剂入环保固定液后依次入苏木精染液,分化,返蓝,伊红,梯度酒精脱水,环保透明液,无苯树胶封固。2结果采用环保试剂制作的冷冻切片,固定效果良好,组织结构清晰,颜色鲜艳,核浆对比分明,透明度好,染色效果与传统试剂无明显差异。3讨论术中病理诊断对临床的诊疗有着重要的指导意义,同时也具有较高的医疗风险。因此,确保冷冻切片的质量显得十分重要,而制作一张高质量的冷冻切片的关键步骤就是固定与染色[1]。传统的冷冻切片固定液主要有丙酮、甲醛、甲醇等[2],但是污染比较大,对人体健康产生危害。丙酮固定组织收缩大,对核的固定也较差;甲醛具有强烈的刺激性的腐蚀性,对人呼吸系统、神经系统产生影响;我科现用甲醇作冷冻切片固定液,虽然固定效果良好,但甲醇对血管神经有毒作用,对视神经和视网膜有特殊选择作用,会使视网膜缺乏营养而导致失明[3]。而同盛环保固定液无色、无味,符合国家环保标准;能沉淀蛋白质,更好地固定染色体、糖原等细胞内结构,固定效果理想,是传统固定液的良好替代品。二甲苯作为最常用的芳香簇化合物被大量应用于病理组织的处理和染色过程中,虽然透明效果好,价格低廉,但其毒害主要是吸入或经皮肤吸收,短期内吸入高浓度二甲苯可出现上呼吸道明显的刺激症状,头晕恶心,长期接触还可诱发癌症。国外已有使用二甲苯替代产品的报道[4-5],本实验采用同盛环保试剂,为无色透明无苯有机溶剂,可以与乙醇互溶。使用过程中无明显刺激气味,不含二甲苯等有毒物质,且透明效果良好,质量稳定,使用方便,有利于室内质控。实验证明,同盛环保试剂具有创新性和实用性,对术中冷冻切片质量效果良好,与传统染色液无差异性;同时对人体无危害,保护环境,是一种理想的传统染色液的替代品。
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