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目的:探讨9型腺相关病毒携带血小板源性生长因子-B(PDGF-B)基因转染修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)的可行性、稳定性及安全性。
方法:将分别携带荧光蛋白基因(GFP)及血小板源性生长因子-B基因(PDGF-B)的9型腺相关病毒转染MSCs,用流式细胞术检测转染效率,收集不同时间点的细胞提取蛋白质行Western blot测定,以及用免疫荧光方法检测血小板源性生长因子-B的表达情况,通过Alamar Blue法对AAV9-PDGF-B转染MSCs进行安全性评估。
结论:AAV9-PDGF-B能成功有效地转染骨髓间充质干细胞,能使干细胞持续过表达PDGF-B至少8周,并对骨髓间充质干细胞无明显毒性作用。
方法:将分别携带荧光蛋白基因(GFP)及血小板源性生长因子-B基因(PDGF-B)的9型腺相关病毒转染MSCs,用流式细胞术检测转染效率,收集不同时间点的细胞提取蛋白质行Western blot测定,以及用免疫荧光方法检测血小板源性生长因子-B的表达情况,通过Alamar Blue法对AAV9-PDGF-B转染MSCs进行安全性评估。
结论:AAV9-PDGF-B能成功有效地转染骨髓间充质干细胞,能使干细胞持续过表达PDGF-B至少8周,并对骨髓间充质干细胞无明显毒性作用。