重组人腺病毒介导p53基因治疗人涎腺腺样囊性癌的体外实验研究

来源 :2014年口腔颌面-头颈肿瘤学术研讨会暨颅底多学科学术沙龙会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gotomis
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  目的:检测携带野生型p53 基因的重组腺病毒颗粒(rAd-p53)体外感染腺样囊性癌细胞ACC-M 后外源性p53 的表达,观察rAd-p53 感染ACC-M 细胞后对其体外黏附、侵袭能力、迁移、增殖及化疗敏感性的影响,探讨rAd-p53 治疗腺样囊性癌临床应用的可行性. 方法:(1)利用携带野生型p53 的重组腺病毒体外感染P53 基因突变的腺样囊性癌细胞ACC-M,应用免疫细胞化学法检测外源性p53 基因在ACC-M 细胞中的表达及感染效率;(2)应用倒置显微镜观察rAd-p53 对ACC-M 细胞形态学的影响;运用MTT 法、划痕实验、Transwell 小室法检测感染前后细胞黏附、迁移、侵袭能力的变化;(3)通过MTT 实验观察rAd-p53 对ACC-M 细胞增殖的影响,再用荧光显微镜观察Hoechst33342 和PI 荧光染色后细胞核形态的改变;(4)通过MTT 测定细胞存活率检测感染rAd-p53 前后ACC-M 细胞对紫杉醇敏感性的影响,应用流式细胞仪检测其对细胞周期分布及凋亡的影响.(5)采用SPSS 17.0 软件包对数据进行单因素方差分析及t 检验.
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