【摘 要】
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目的：探讨白细胞介素1β(IL-1β)促进胃癌细胞生长的机制.方法：采用芯片筛选IL-1β处理后人胃癌细胞系(AGS)细胞中差异表达的miRNAs；应用生物信息学手段及双荧光素酶报告系统筛选并验证miR-425的靶基因；CCK-8检测细胞增殖率；流式细胞仪检测细胞的凋亡；实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测临床样本及细胞中miR-425的表达.结果：(1)IL-1β处理AGS细胞后,
【机 构】
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复旦大学附属中山医院中医/中西医结合科,200032
【出 处】
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中华中医药学会综合医院中医药工作委员会2016年学术年会
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目的：探讨白细胞介素1β(IL-1β)促进胃癌细胞生长的机制.方法：采用芯片筛选IL-1β处理后人胃癌细胞系(AGS)细胞中差异表达的miRNAs；应用生物信息学手段及双荧光素酶报告系统筛选并验证miR-425的靶基因；CCK-8检测细胞增殖率；流式细胞仪检测细胞的凋亡；实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测临床样本及细胞中miR-425的表达.结果：(1)IL-1β处理AGS细胞后,29个miRNAs表达上调,17个miRNAs表达下调.其中miR-425在IL-1β处理后表达上调最明显.Real-time PCR结果显示,相比癌旁组织,miR-425在胃癌组织中表达显著上调(均值1.41与5.81,P＜0.000 1)；(2)使用生物信息学方法miRecords预测miR-425的潜在靶基因,经双荧光素酶报告检测,证实PTEN是miR-425的直接靶标；(3)使用核因子(NF)-KB单克隆抗体对AGS细胞行染色质免疫沉淀,证实NF-KB蛋白与miR-425的启动子中形成了复合物.荧光素酶报告基因的结果显示：miR-425启动子上B结合位点是IL-1β诱导miR-425转录激活必需的；(4)IL-1β诱导的miR-425表达上调促进细胞的增殖,抑制细胞凋亡.结论：IL-1β通过激活NF-KB诱导miR-425表达上调,负性调控PTEN进而促进胃癌细胞的增殖和抗凋亡作用.
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