【摘 要】
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禽痘病毒作为活载体已经得到广泛的应用，转移栽体的构建是重组禽痘病毒构建的重要环节。本研究构建了禽痘病毒通用转移载体pSY681-gfp-gpt，该载体含有gfp和gpt两个报告基因及背对的痘苗病毒晚期启动子P11和早期启动子P7.5，P11启动gfp和gpt两个基因，P7.5用于启动外源基因，在早期启动子P7.5下游引入NotⅠ和AflⅡ两个酶切位点，用于外源基因的插入。为检测禽痘病毒通用转移载体
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室重点开放实验室，兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150001；新疆农业大学动物医学院，新疆 乌鲁木齐 830052
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
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禽痘病毒作为活载体已经得到广泛的应用，转移栽体的构建是重组禽痘病毒构建的重要环节。本研究构建了禽痘病毒通用转移载体pSY681-gfp-gpt，该载体含有gfp和gpt两个报告基因及背对的痘苗病毒晚期启动子P11和早期启动子P7.5，P11启动gfp和gpt两个基因，P7.5用于启动外源基因，在早期启动子P7.5下游引入NotⅠ和AflⅡ两个酶切位点，用于外源基因的插入。为检测禽痘病毒通用转移载体pSY681-gfp-gpt的效果，将H9亚型禽流感病毒A/Chicken/Shanghai/10/01(H9N2)的HA基因插入到此载体构建了转移载体pSY681-gfp-gpt-HA，应用TransIT(R)-LT1 Transfection Reagent将此转移载体转染已感染禽痘病毒S-FPV-017的鸡胚成纤维细胞，利用gfp和gpt同时进行双重筛选、数轮蚀斑纯化构建了重组病毒rFPV-gpt-gfp-HA9，通过PCR、Western blot鉴定，结果证明，获得了能稳定表达AIVHA蛋白的重组禽痘病毒r-FPV-gpt-gfp-HA9。
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小反刍兽疫病毒(PPRV)对绵羊和山羊的发病率和死亡率分别可高达100％和90％，在发展中国家引起严重的社会经济问题，被OIE列为A类疾病。该病首次报道于西非的科特迪瓦，其后流行于撒哈拉以南和赤道以北的多数非洲国家，中东到土耳其的几乎全部国家，在南亚、西亚、印度和它的领国都广泛传播。中国的周边国家老挝、孟加拉国、印度、尼泊尔、俄罗斯、巴基斯坦和缅甸等国都曾于2003年暴发过大规模的小反刍兽疫疫情。
根据GenBank发表的N1和N2亚型猪流感NA基因序列设计引物，扩增出NA基因片段，将其克隆到pFastBacGP67A和pFastBacGP67C杆状病毒载体上，筛选阳性重组转座载体pFastBacGP67A-N1和pFastBacGP67C-N2，转化含有杆状病毒穿梭载体(Bacmid)的DH10Bac感受态细胞，构建杆状病毒表达载体获得重组转座子rBacmid-N1和rBacmid-N2，
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小反刍兽疫自2007年开始传入我国西藏地区，给我国养羊业安全带来极大威胁。但目前有关小反刍兽疫侵染方式、致病机理以及流行病学方面的研究相对较少。本文通过考察麻疹病毒这些方面的情况讨论了小反刍兽疫病毒特别的侵染方式、系统感染现象、免疫逃避机制、群体流行以及将来应该关注的研究重点。
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是以母猪生殖障碍和仔猪严重呼吸困难导致的高死亡率为特征的一种高度接触性传染病。本病于1987年首次在美国发现,又称“蓝耳病”，已流行于世界许多国家和地区，在我国也呈地方流行，对养猪业构成巨大威胁。PRRSV基因组为单股，正链RNA，大小为15kb左右。含8个开放阅读框架(ORF)，其中ORF1位于病毒基因组5端非编码前导序列之后，占基因组的80％，编码病毒RNA复制酶
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