Aurora A通过HDAC6-IFT88信号轴调控初始纤毛表达影响骨肿瘤细胞的生长

来源 :中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mkms2080
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  目的:Aurora A是一种调控细胞有丝分裂的蛋白激酶,与中心体的成熟和纺锤体的聚合有关,在多种肿瘤组织中存在异常表达,但其如何影响肿瘤细胞生长的作用机制尚未清楚,本研究旨在明确Aurora A如何调控骨肿瘤初始纤毛表达并阐明其可能影响骨肿瘤生长的作用机制。方法:通过免疫组化法染色检测骨肿瘤组织中Aurora A蛋白激酶的表达水平并明确其与细胞增殖能力的关系,western blot检测不同类型骨肉瘤细胞系(MG63,HOS,SW1353)中Aurora A蛋白的表达情况;通过使用漆树酸(Anacardic Acid)活化Aurora A蛋白激酶,Danusertib抑制其活性,Tubastatin A抑制下游乙酰化修饰相关蛋白HDAC6的活性,分别用免疫荧光实验检测细胞初始纤毛的表达情况并用western blot检验纤毛相关蛋白的表达差异;western blot实验检测不同Aurora A活性条件下骨肉瘤细胞系增殖相关蛋白Cyclin D1,PCNA和侵袭相关蛋白MMP2,MMP9的表达情况,明确对细胞骨架α-tubulin乙酰化修饰及功能相关蛋白HDAC6和IFT88蛋白的表达情况;最后构建骨肉瘤裸鼠模型,每周两次给予30mg/kg Danusertib瘤旁注射,2周后取出瘤体,比较瘤体大小差异。
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