[目的]为了更有效地治疗母猪乳房炎,将氟尼辛葡甲胺与庆大霉素进行配伍制成复方庆大霉素注射液。同时,研制新的复方庆大霉素注射液需要选择合适的溶剂和辅料,而复方庆大霉素注射液的质量控制关键在于准确地测定氟尼辛葡甲胺的含量。目前,氟尼辛葡甲胺的含量测定方法有很多,如高效液相色谱-质谱联合应用、液相色谱-质谱联合应用等。然而,上述测定氟尼辛葡甲胺含量的方法复杂且操作繁琐。为了建立更高效的高效液相色谱法测定复方庆大霉素注射液中氟尼辛葡甲胺的含量,[方法]选用色谱柱Thermo Accucore C18 100×2.1mm,2.6μm;流动相A为0.1%三氟乙酸水溶液,B为乙腈;流动相A与B之间的比例为9:1;用DAD检测器检测波长为254nm;流速0.4mL/min;柱温30℃,进样体积2.00μL。化合物的色谱图采集和积分由软件Chemstation进行处理。用内标法计算待测样品中氟尼辛葡甲胺的含量。[结果]结果表明,氟尼辛葡甲胺在该色谱条件下具有良好的系统适应性。回归方程的结果如下:y=2.54535x+0.0206952。线性相关系数为0.99991,结果表明氟尼辛葡甲胺的浓度在31.25～1000μg/mL范围内线性相关性良好。平均回收率在102.71%～108.33%之间,相对标准偏差为2.35%,小于3%。精密度试验中的所有相对标准偏差都低于5%。复方庆大霉素注射液中氟尼辛葡甲胺的平均含量为212.8μg/mL,为标示量的106.4%,结果符合中国兽药典的规定。[结论]本试验所建立的方法可用于复方庆大霉素注射液中氟尼辛葡甲胺的含量测定。