【摘 要】
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家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)是引起家蚕微粒子病的主要病原体,具有较广的寄主域,微粒子病的发生时常对蚕丝业造成巨大的经济损失.微孢子虫孢壁蛋白是孢子壁的主要成分,在微孢子虫的侵染和孢子黏附的过程中扮演着重要的角色.本试验利用家蚕核型多角体病毒Bac-to-Bac表达系统,将家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25基因和绿色荧光蛋白报告基因EGFP克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1中,并
【机 构】
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江苏科技大学,江苏镇江212003 江苏科技大学,江苏镇江212003;中国农业科学院蚕业研究所,
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家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)是引起家蚕微粒子病的主要病原体,具有较广的寄主域,微粒子病的发生时常对蚕丝业造成巨大的经济损失.微孢子虫孢壁蛋白是孢子壁的主要成分,在微孢子虫的侵染和孢子黏附的过程中扮演着重要的角色.本试验利用家蚕核型多角体病毒Bac-to-Bac表达系统,将家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25基因和绿色荧光蛋白报告基因EGFP克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1中,并转化DHI0BmBac感受态细胞,经同源重组获得重组杆状病毒穿梭质粒vBmEGFP-SWP25,随后将其转染家蚕细胞BmN获得含有目的基因的重组杆状病毒.转染成功的细胞可观测到绿色荧光信号,使用Western-blot方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞中检测到大小约55kDa的重组蛋白条带.结果表明,家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25基因可在BmN细胞中成功表达,这为继续研究其功能以及与之互作的宿主蛋白奠定了基础.
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