【摘 要】
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目的 探讨砷对肝脏microRNA表达的影响,筛选出敏感、稳定的应答microRNA,为后续研究提供基础数据.方法 SD雄性大鼠分别给予0,0.1,1,10及100 mg·L-1亚砷酸钠的饮用水,染
【机 构】
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School of Public Health and Health Professions, the State University of New York, Buffalo,NY 14214,
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目的 探讨砷对肝脏microRNA表达的影响,筛选出敏感、稳定的应答microRNA,为后续研究提供基础数据.方法 SD雄性大鼠分别给予0,0.1,1,10及100 mg·L-1亚砷酸钠的饮用水,染毒60 d后,收集肝.每个剂量组选取3个样本,共15个样本,应用高通量RNA测序技术对所选取样本的microRNA表达进行定量.依照microRNA的表达谱对15个样本运用无监督层次法进行聚类分析,并且进行主成分分析.应用趋势检验分析microRNA的表达水平与砷浓度的关系.选取具有显著性差异表达的6个microR NA,应用实时定量PCR对其表达水平进行测定,验证RNA测序结果与实时定量PCR结果的一致性.结果 对15个样本进行聚类分析发现,聚类分组与砷接触浓度有统计学显著性关系(P=0.0012).剔除1个离群值,对其中14个样本的microRNA表达谱进行了主成分分析,结果表明砷接触水平对变异具有显著的贡献.对不同砷剂量组间的microRNA表达水平进行了分析,与对照组相比,miR-148b,mlR-151,mlR183,miR-192,miR-26a,及miR-423的表达水平发生明显改变,并且该变化与砷浓度呈明显的剂量-反应关系(趋势检验P＜ 0.01).运用实时定量PCR对上述6个microRNA的表达水平进行验证,结果表明miR151,miR-183,miR-26a及miR-423的表达水平随砷浓度变化具有显著的趋势性(P＜0.05),miR-148b的趋势性检验结果在界值附近(P=0.0669),miR-192的表达不随砷浓度的变化而变化(P＞0.1).对具有差异表达的microRNA的功能预测及文献结果分析表明,这些microRNA在功能上与砷毒性的形成与肿瘤的发生发展有关.结论 大鼠接触砷污染饮用水,可以引起肝脏microRNA表达的改变.
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