【摘 要】
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南极假丝酵母脂肪酶B是用途最为广泛的脂肪酶之一,具有高催化活性及对映选择性,特别是动力学拆分外消旋仲醇和胺以及前手性二醇,但是通常对手性中心为羧酸部分的酯水解动力学
【机 构】
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浙江省生物有机合成技术研究重点实验室生物工程学院浙江工业大学;
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南极假丝酵母脂肪酶B是用途最为广泛的脂肪酶之一,具有高催化活性及对映选择性,特别是动力学拆分外消旋仲醇和胺以及前手性二醇,但是通常对手性中心为羧酸部分的酯水解动力学拆分的活性及选择性较差。本文结合CAST和定点饱和突变策略对南极假丝酵母脂肪酶B进行半理性改造,显著提高其对N-乙酰-哌啶-2,3-二甲酸二甲酯的拆分效率。其中突变体CALB-I189K的酶活力是CALB-WT的286倍。0.8g/L的CALB-I189K纯酶在8h内将500g/L的N-乙酰-哌啶-2,3-二甲酸二甲酯拆分完全(ee>99%)。本研究为脂肪酶的分子改造提供了理论指导,并为其在在医药中间体生产中的应用奠定了基础。
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