【摘 要】
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目的:研究沉默Yap 基因对人牙周膜干细胞(Human Periodontal ligament stem cells,h-PDLSCs)增殖、凋亡、周期及衰老的影响并进一步探讨Hippo-Yap 通路对h-PDLSCs 增殖、凋亡等的分子调控机制.材料与方法:构建沉默Yap 基因的慢病毒载体,包装病毒转染细胞.应用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western b
【机 构】
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山东大学口腔医学院;山东省口腔组织再生重点实验室
【出 处】
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2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会
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目的:研究沉默Yap 基因对人牙周膜干细胞(Human Periodontal ligament stem cells,h-PDLSCs)增殖、凋亡、周期及衰老的影响并进一步探讨Hippo-Yap 通路对h-PDLSCs 增殖、凋亡等的分子调控机制.材料与方法:构建沉默Yap 基因的慢病毒载体,包装病毒转染细胞.应用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)、免疫荧光(immunofluorescence staining)检测Yap 的表达水平;敲除效率最高为实验组(sh-Yap)、空白序列为对照组(NC),CCK-8 以及EdU 检测增殖能力的改变;Annexin V-APC 染色流式检测细胞凋亡的变化;PI 染色流式检测细胞周期的变化;β-半乳糖苷酶活性检测细胞衰老情况;RT-PCR 检测干性基因的表达,Western blot 验证增殖凋亡相关信号通路交叉作用;SPSS 19.0 软件对数据进行处理,设P<0.05 为差异有统计学意义.
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