[目的]从蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum转录组数据中找寻目标基因,克隆其cDNA全序列,并进行酶活性测定、原核表达及抗体制备,同时对基因的时空表达模式进行分析,并推测其可能的生物学功能.[方法]解剖蝶蛹金小蜂雌蜂毒腺,分离毒液,使用α-淀粉酶试剂盒检测酶活性.分析蝶蛹金小蜂转炉组数据,设计引物,提取雌蜂总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术,扩增编码该基因的cDNA全序列.利用原核表达载体pET-28a在大肠杆菌中表达两个编码2个基因成熟肽的cDNA序列,并用Ni-NTA亲和层析柱对表达产物进行纯化,制备针对2个表达产物的多克隆抗体.同时利用定量PCR分析两基因表达水平的组织特异性表及其随雌成蜂发育的动态变化.[结果]本研究参照蝶蛹金小蜂的转录组数据成功克隆得到2个α-淀粉酶基因,将其分别命名为PPU 11450和PPU11452.两个基因分子特性分析结果如下：PPU11450基因全长1802bp,编码521个氨基酸,分子量59.3KD,室温下在毒腺中酶活为12.94U/mg；PPU11452基因全长1863bp,编码519个氨基酸,分子量为57.5KD.定量PCR结果表明,PPU11450在毒腺中特异性高表达,并且在羽化后7天的未交配雌蜂中表达量达到高峰；而PPU 11452在寄生蜂各组织均有表达,胸部表达量最高,羽化后不同天数的未交配雌蜂体内表达量总体差异不大.[结论]推断PPU 11452可能在寄生蜂代谢供能方面起一定作用,而PPU11450则存在于蝶蛹金小蜂毒腺内或可能伴随寄生过程随毒液进入寄主体内,这可能与寄生蜂寄生行为或与寄主间相互作用有关.后期我们将会采用RNAi技术与表型观察并结合RNA-Seq,对两个基因功能进行深入研究.