TALENs and CRISPR/Cas9 system mediated bi-allelic and multiplegene modifications in pigs at one step

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  Pigs are important for agriculture and study of human diseases.Transcription activator-like effector nucleases(TALENs)and clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated(Cas)9 system(CRISPR/Cas9)show enormous potential for gene engineering in various species,including pigs.Here,we used TALENs and CRISPR/Cas9 system to target single genes(GGTA 1,Parkin,DJ-1)and triple genes(Parkin/DJ-1/P I N K 1)in the porcine genome.The targeting efficiency of TALENs was 2.5%-22%,while the CRISPR/Cas9 system reached an efficiency of up to 100%.DJ-1 knockout(KO)piglets were generated by somatic cell nuclear transfer from targeted fibroblasts and Parkin/DJ-1/P I N K 1 triple targeted pigs were generated by direct embryo injection.These pigs would provide valuable information for studying Parkinson's disease in human.
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